脑梗,又称缺血性脑卒中,是由各种不同致病因素导致的脑组织局部血供中断或部分中断,导致脑组织缺血缺氧的一种脑血液循环障碍性疾病,临床上患者虽然能够被及时救治,但往往遗留有严重运动功能障碍、认知功能障碍及感觉功能障碍,日常生活功能下降,极大地降低了生活质量。脑梗是世界范围内仅次于心脏病和癌症的第三位高致残、致死率的疾病,我国脑梗发病率在全球位居前列,且呈现逐年增加、逐年低龄化趋势,是医药领域的重要研究课题。
大鼠脑梗模型是研究临床脑缺血病理生理变化和为治疗提供依据的重要工具。其造模原理是阻断大鼠大脑中动脉(MCA)血流,常用的方法有:开颅电凝阻断MCA、微栓子栓塞阻断、血管内栓线阻断、光化学诱导血栓形成阻断等。
其中血管内栓线阻断法不需开颅和特殊设备,缺血部位恒定,且可进行再灌注,模拟了人类永久性及短暂局灶性脑缺血的不同状态,是理想的标准局灶性脑缺血动物模型。
实验动物:大鼠。
方法:血管内栓线阻断法
实验分组:
脑梗组(Model组):进行完整手术,包括MCA的暂时性结扎阻断(90分钟)。
假手术组(Sham组):除不进行MCA的结扎阻断外,所有其他手术步骤均相同。
实验步骤:
麻醉成功后大鼠固定于动物手术台,进行常规备皮,消毒颈部皮肤。
术中:
沿颈部正中线做长约1cm左右的切口,并逐层钝性分离颈部腺体组织以及筋膜组织,暴露颈部迷走神经、右侧颈总动脉(CCA)以及颈内动脉(ICA)和颈外动脉(ECA),将栓线从颈外动脉切口缓慢插入至大脑中动脉起始处,结扎中动脉90min后,移出线栓恢复血流,然后逐层缝合并消毒伤口。
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术后:
将大鼠单独放在干净的鼠笼中,送回动物房。
暴露大鼠 CCA、ICA、ECA
将栓线从颈外动脉切口插入
结扎中动脉 90min
神经功能缺损评分标准如下:
采用Longa的5级4分标准方法进行大鼠神经功能缺损评分,标准如下:
TTC染色法
TTC属于脂溶性光敏感复合物,与正常组织中的脱氢酶发生反应就会呈现红色,但是在缺血组织中,由于内脱氢酶活性下降,不能反应,所以不会产生变化呈苍白,是评价脑缺血损伤常用的指标。
正常大鼠
脑梗大鼠